Bioquímica Clínica

Como a bioquímica clínica é baseada no teste de líquidos ou suspensões, é necessária água de elevada qualidade para quase todas as etapas do processamento das amostras, desde a diluição de reagentes, amostras e detergentes até à lavagem de recipientes de reação e sondas de amostras. A fraca qualidade da água pode interferir com os próprios testes, levando a resultados incorretos ou enganosos, e afetar o funcionamento geral dos analisadores, aumentando a probabilidade de avarias. 

Que tipos de contaminantes na água podem afetar os resultados de bioquímica clínica? 

Os principais tipos de impurezas que afetam o desempenho dos analisadores de bioquímica clínica são partículas, iões, bactérias e subprodutos bacterianos e orgânicos. 

1. Partículas 

Devido aos volumes muito baixos de amostras e reagentes utilizados, a presença de partículas durante as operações de pipetagem pode fazer com que volumes inconsistentes de reagentes e/ou amostras sejam adicionados ao recipiente de reação, reduzindo a especificidade e a sensibilidade dos ensaios. Adicionalmente, as partículas poderão aumentar a opacidade da mistura de reação, causando reduções adicionais na sensibilidade. 

As partículas insolúveis ou de baixa solubilidade também podem afetar o funcionamento do analisador, bloqueando capilares utilizados para transferências líquidas e fazendo com que depósitos ou incrustações se formem em junções e limites líquidos, incentivando o crescimento bacteriano e a formação de biofilmes. 

2. Iões 

A contaminação iónica dá origem a uma variedade de problemas, afetando o desempenho de testes químicos e imunoensaios. Por exemplo, os iões na água de lavagem podem causar contaminação cruzada/transporte, enquanto os iões no diluente ou em padrões podem afetar a estabilidade dos reagentes, causando um desvio ao longo do tempo e a perda de precisão. A baixa resistividade que resulta deste tipo de contaminação também pode levar à necessidade de calibração mais frequente com consumo e desperdício excessivos de reagentes, aumentando os tempos e custos dos testes. 

3. Bactérias e subprodutos bacterianos 

A presença de bactérias no fornecimento de água do analisador pode afetar o desempenho geral do instrumento e os resultados do ensaio de diversas formas. À semelhança das partículas, estas causam bloqueios ou depósitos ao longo do percurso do fluido, reduzindo a precisão das transferências de líquido e a eficácia dos sistemas de lavagem. O desempenho do ensaio também pode ser afetado pelo crescimento bacteriano, aumentando a opacidade das misturas de reação – diminuindo a sensibilidade – e reduzindo a estabilidade de amostras e reagentes. Da mesma forma, vários subprodutos bacterianos podem interferir diretamente com as químicas ou a ligação dos ensaios. Por exemplo, corantes à base de fluoresceína libertados por bactérias como a Pseudomonas aeruginosa podem originar brancas elevadas e padrões fora do intervalo durante a calibração, bem como resultados falso positivos. 

4. Orgânicos 

Uma variedade de compostos orgânicos pode interferir direta ou indiretamente no desempenho e na deteção do ensaio. O mecanismo exato e o grau de interferência variam significativamente consoante o contaminante, o analito e o método de deteção, levando a resultados imprevisíveis e inconsistentes. Por exemplo, os ácidos carboxílicos podem interferir com a atividade enzimática e os imunoensaios, fazendo ligação a sítios ativos e formando complexos com metais cofatores. Outros orgânicos podem inibir enzimas através de diferentes mecanismos e afetar a deteção fluorescente. 

Quais são os requisitos de pureza da água para bioquímica clínica? 

Para evitar os diversos problemas associados à contaminação da água descrita acima, o College of American Pathologists (CAP) – o organismo internacionalmente reconhecido responsável pela acreditação de laboratórios clínicos nos EUA – recomenda que toda a água utilizada para qualquer aplicação em testes laboratoriais cumpra, no mínimo, o padrão Clinical Laboratory Reagent Water (CLRW) especificado pelo CLSI. Além disso, a água de alimentação do instrumento deve cumprir as especificações do fabricante do instrumento – podendo ser mais rigorosas do que os padrões CLRW – para garantir resultados precisos e reproduzíveis. 

Especificações CLRW/CLSI:

A especificação de resistividade CLRW > 10 MΩ.cm restringe as concentrações de impurezas iónicas a níveis de ppb ou inferiores e requer a eliminação de dióxido de carbono. Isto é adequado para a maioria do trabalho clínico, mas, quando é necessário determinar os oligoelementos, a resistividade precisa de ser muito maior – a 18,2 MΩ.cm. Da mesma forma, o CLRW depende da filtração para remover partículas, mas os filtros de 0,2 μm especificados nem sempre podem ser adequados com os volumes de líquidos muito baixos utilizados nos ensaios clínicos modernos. 

A especificação de TOC < 500 ppb em CLRW é um reflexo de padrões anteriores e ainda pode levar à presença de uma ampla variedade de compostos orgânicos, tais como ácidos carboxílicos e poliaromáticos, que podem comprometer ensaios de baixo volume. A contaminação bacteriana também tem efeitos graves em todos os aspetos do funcionamento do analisador, exigindo níveis consistentemente baixos de contaminação para evitar a formação de biofilme e problemas contínuos. 

Os fornecimentos de água utilizados para bioquímica clínica devem, portanto, ser validados como adequados para a finalidade e o CLSI realça a necessidade de tendências rigorosas dos parâmetros do sistema de água para garantir que a pureza da água seja alcançada e mantida. 

Como é que a ELGA resolve problemas de pureza da água para bioquímica clínica? 

A experiência da ELGA e a sua reputação de longa data garantem que a sua equipa experiente pode ajudar os clientes a determinarem o nível de pureza da água necessário para as suas aplicações. A empresa oferece uma gama de sistemas de purificação de água para aplicações clínicas, tendo cada um as suas próprias vantagens e limitações. Por exemplo, a gama CENTRA® de sistemas centralizados de purificação e distribuição revolucionou a forma como grandes volumes de água pura são produzidos, armazenados e distribuídos em laboratórios clínicos. O CENTRA R-200 é um sistema completo de purificação, armazenamento, controlo e distribuição de água, que fornece água pura Tipo I (Ultrapura), Tipo II e Tipo III, com um módulo de osmose reversa de 200 litros por hora e filtros de 0,2 μm. 

Conclusão

A pureza da água de alimentação do instrumento é crucial para o funcionamento normal e consistente de analisadores totalmente automatizados de química clínica e imunoensaio. A combinação de instrumentação de alto rendimento e ensaios de alta sensibilidade e baixo volume requer água de pureza muito elevada, com teor mínimo de partículas, iões, orgânicos, bactérias e subprodutos bacterianos para garantir a precisão dos resultados a longo prazo. A ampla gama de sistemas de purificação de água da ELGA ajuda os laboratórios clínicos em todo o mundo a garantirem que os testes de doentes não sejam afetados por impurezas da água.