Question 1

Como funciona a cultura celular?

Accepted Answer

A cultura de células envolve o crescimento de células em meio especificamente selecionado para o tipo de célula escolhido, como uma suspensão ou uma cultura aderente (monocamada). Normalmente, o meio conterá compostos como aminoácidos, glicose, vitaminas, sais inorgânicos e lipídios. Eles também podem conter soro animal, fatores de crescimento, hormônios, antibióticos e antioxidantes. Vários tipos de meios estão disponíveis, incluindo opções baseadas em soro, sem soro, sem animais, sem proteínas e quimicamente definidas, que podem ser suplementadas com outros componentes, por exemplo, soro de bezerro. As células são então cultivadas em uma incubadora para garantir que as condições ideais de crescimento celular - como temperatura e conteúdo de oxigênio e dióxido de carbono - sejam mantidas. As células cultivadas requerem um suprimento constante de nutrientes para sustentar um crescimento saudável e, portanto, a mídia deve ser reabastecida regularmente. Além disso, as linhas de células aderentes precisam ser subcultivadas, uma vez que atingem a confluência - o ponto em que a área de superfície disponível é totalmente coberta - para permitir o crescimento contínuo. É vital evitar qualquer contaminação da cultura, seja química ou biológica, tanto durante a substituição do meio quanto na subcultura.

Question 2

Para que serve a cultura celular?

Accepted Answer

A cultura de células tem muitas aplicações em pesquisa, bioprodução e diagnóstico. Culturas de células animais, vegetais e bacterianas são rotineiramente usadas para estudar processos biológicos e genéticos, bem como para produzir moléculas derivadas biologicamente, incluindo vacinas, proteínas, enzimas, anticorpos e hormônios. Por exemplo, na descoberta e desenvolvimento de medicamentos, as culturas de células de mamíferos fornecem modelos para o estudo de doenças, permitindo a identificação e validação de alvos. Eles também são usados ​​em ensaios de triagem baseados em células de alto rendimento, para testar a eficácia e segurança de novos medicamentos em potencial. Em um ambiente clínico, as técnicas de cultura de células são frequentemente usadas para determinar o organismo responsável por uma doença infecciosa e identificar os agentes antimicrobianos mais eficazes para tratá-la.

Question 3

Por que você usaria técnicas de cultura celular?

Accepted Answer

As técnicas de cultura de células são uma ferramenta extremamente importante na biologia celular e molecular. Eles fornecem aos pesquisadores excelentes sistemas de modelos para estudar a fisiologia e a bioquímica normais das células, os efeitos de drogas e compostos tóxicos e mutagênese e carcinogênese.

Question 4

Qual é o impacto da água na cultura celular?

Accepted Answer

Culturas contaminadas e morte celular são um grande problema que pode, em última análise, ter impacto em experiências a jusante. A qualidade da água desempenha um papel importante nos resultados experimentais da cultura de células e é utilizada durante todo o processo. Não só é o principal componente dos tampões e meios, como também é utilizada para a dissolução de aditivos e drogas, etc.

A água ultrapura apirogénica (Tipo I) deve ser utilizada para a preparação de meios e tampões de modo a garantir que as células estão isentas de contaminantes bacterianos, de leveduras e virais. A contaminação da cultura celular por iões metálicos, endotoxinas, bactérias ou fungos pode ter um impacto directo ou indirecto na cultura (por exemplo, alterações do pH).

Question 5

Que tipos de contaminantes na água podem afetar os resultados da cultura celular?

Accepted Answer

1. Bactérias As bactérias prosperam em condições típicas de cultivo de células e podem rapidamente ultrapassar as células de interesse, fazendo com que os níveis de nutrientes caiam e os subprodutos tóxicos aumentem. A contaminação bacteriana também pode levar a mudanças repentinas no pH do meio e à contaminação de culturas anteriormente puras. 2. Endotoxinas As endotoxinas são liberadas pela maioria das bactérias Gram-negativas. Essas endotoxinas afetam vários tipos de células, mesmo aquelas sem receptores de endotoxina CD14, e estimulam macrófagos e fagócitos mononucleares a liberar uma variedade de citocinas pró-inflamatórias. Os efeitos adversos resultantes incluem mudanças no crescimento e função celular, a produção de proteínas recombinantes e uma redução na eficiência da clonagem. 3. Compostos orgânicos Pequenos compostos orgânicos comumente encontrados na água - como ácidos húmicos, taninos, pesticidas e desreguladores endócrinos - podem afetar o desenvolvimento celular. Eles fornecem uma fonte descontrolada de nutrientes para o crescimento bacteriano e devem ser removidos da água usada para preparação de materiais para cultura de células. 4. Íons Os contaminantes iônicos, particularmente íons multivalentes e metais pesados, devem ser mantidos baixos. Os metais pesados ​​- por exemplo, mercúrio e chumbo - são conhecidos por serem citotóxicos para uma variedade de tipos de células.

Question 6

Quais são os requisitos de medição de água para cultura de células?

Accepted Answer

Usar o tipo de água certo para sua aplicação é essencial. Água para cultura de células de mamíferos normalmente requer apirogênica, água ultrapura Tipo I, embora a água Tipo II + seja adequada para culturas de células bacterianas, que são menos sensíveis. Água Tipo I deve ser usada para a preparação de meios e tampões para garantir que as células estejam efetivamente livres de contaminantes bacterianos, de leveduras e virais.

Question 7

Como ELGA resolve problemas de pureza de água para cultura de células?

Accepted Answer

A experiência e a reputação de longa data da ELGA garantem que sua equipe experiente possa ajudar os clientes a determinar o nível de pureza da água necessário para suas aplicações. A empresa oferece uma variedade de sistemas de purificação de água para aplicações em cultura de células, cada um com suas próprias vantagens e limitações. Por exemplo, a linha CENTRA® de sistemas centralizados de purificação e distribuição revolucionou a maneira como grandes volumes de água pura são produzidos, armazenados e distribuídos em laboratórios. O CENTRA R-200 é um sistema completo de purificação, armazenamento, controle e distribuição de água que fornece água pura Tipo I (Ultrapura), Tipo II e Tipo III, com módulo de osmose reversa de 200 litros por hora e filtros de 0,2 µm.

Question 8

Quais são as conclusões da cultura celular?

Accepted Answer

A cultura de células é uma ferramenta fundamental na biologia celular e molecular, e as necessidades exatas de água são determinadas pelo tipo de cultura. A água para cultura de células bacterianas deve ser de pelo menos qualidade Tipo II +, enquanto a cultura de células de mamíferos mais sensível requer água ultrapura Tipo I com alta resistividade (> 18 MΩ.cm) e essencialmente livre de bactérias, endotoxinas e outros contaminantes. A ampla gama de sistemas de purificação de água do ELGA ajuda laboratórios em todo o mundo a realizar técnicas de cultura de células sem se preocupar com as impurezas da água.

	É necessária sensibilidade	Resistividade (MΩ.cm)*	TOC (ppb)	Filtro (µm)	Bactérias (UFC/ml)	Endotoxinas (EU/ml)	Nucleases	Qualidade da água
Cultura de células bacterianas	Geral	>1	<50	<0,2	<1	NA	NA	II
Cultura de células de mamíferos	Elevado	>18	<10	Ultrafiltro	<1	<0,002	Não detetado	I
Cultura de tecidos vegetais	Elevado	>18	<10	Ultrafiltro	<1	<0,002	Não detetado	I
Histologia	Geral	>1	<50	<0,2	<1	NA	NA	Laboratório geral
Hidropónica	Geral	>1	<50	<0,2	<1	NA	NA	Laboratório geral

Culturas de célula

A cultura de célula é uma técnica de laboratório bastante usada, onde as células são cultivadas sob condições controladas tipicamente fora do seu ambiente natural.

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